本报讯 欧洲分子生物学实验室Julia Mahamid等研究人员开发出用于cryo-EM亚细胞蛋白质定位的遗传编码多聚标签。相关研究近日发表于《自然-方法学》。

研究人员提出了一种配体诱导型细胞内蛋白质标记策略，该策略基于25纳米大小的荧光遗传编码多聚体颗粒（GEM）。这些颗粒具有可识别的结构特征，可通过卷积神经网络低温电子断层成像（cryo-ET）数据对其自动检测。通过添加小分子配体触发GEM与绿色荧光蛋白标记的相关大分子的耦合，实现时间可控的标记，最大限度减少对原生蛋白功能的干扰。

研究人员利用低温相关荧光和cryo-ET技术展示了GEM在人体细胞不同细胞器中，对内源性和过表达蛋白质进行亚细胞级定位的适用性。研究人员介绍了量化标记特异性和效率的方法，以及针对稀有和丰富蛋白质靶点进行系统优化的方法，其重点是评估标记对蛋白质功能的潜在影响。

据悉，cryo-ET技术可对原生细胞环境中的大分子组装体进行无标记高分辨率成像。然而，在层析体积中对感兴趣的大分子进行定位是一项挑战。（柯讯）

相关论文信息：https://doi.org/10.1038/s41592-023-02060-1