本报讯 西湖大学生命科学学院陶亮团队与施一公团队合作，首次揭示了超毒力分支艰难梭菌毒素B的肠道上皮受体——TFPI蛋白。这意味着，他们发现了艰难梭菌毒素B入侵人体的新“大门”。近日，研究成果在线发表于《细胞》。

此前，陶亮团队已破解了部分毒素B（TcdB）是如何通过FZD蛋白这扇“大门”进入肠道上皮细胞的。利用CRISPR/Cas9的基因敲除文库筛选技术，团队锁定了一个名为组织因子途径抑制因子（TFPI）的蛋白，认为其很可能是两种毒素B变体——TcdB2和TcdB4进入细胞的“另一扇门”。

为了验证这一猜想，研究团队首先构建了TFPIβ敲除的小鼠，随后对小鼠进行腹腔注射TcdB4毒素挑战实验，发现有超过60%的纯合型小鼠存活了下来。“这证明TFPI是TcdB4的关键受体，并且显示了肾脏是全身系统感染下的主要受损器官。”陶亮说。

陶亮团队与施一公团队的研究员李颜颜等开展合作，利用冷冻电镜单颗粒三维重构技术，解析了分辨率为3.1埃的毒素—受体复合物的三维结构。团队对艰难梭菌毒素B进入细胞的路径进行了归类：第一类以TcdB1/3/5为代表，从FZD“大门”进入；第二类主要包含超毒力分支的TcdB2和TcdB4，选择通过TFPI“大门”进入。

研究团队构建了一种“TFPI诱饵”，即含有TFPI部分关键区域的可溶性蛋白来迷惑并诱捕毒素分子。结果发现，无论是在细胞水平还是小鼠模型中，这类“TFPI诱饵”都可以有效阻止超毒力分支艰难梭菌毒素B的破坏，起到了显著的保护作用。这不仅进一步证实TFPI是TcdB在肠道上皮中的受体，也预示了可溶性TFPI作为中和蛋白在防治超毒力艰难梭菌感染中的潜在应用价值。（温才妃 张弛）

相关论文信息：https://doi.org/10.1016/j.cell.2022.02.010